Santa María Eufrasia nació como Rosa Virginia Pelletier en la isla de Noirmoutier, frente a la costa Francesa, el 31 de julio de 1796. Sus padres fueron encarcelados en la isla durante la Revolución Francesa. Creció en el turbulento periodo posterior a la revolución. Su padre era médico y atendía tanto a los habitantes de la isla como a sus captores. Su madre alimentaba a los hambrientos y cuidaba a los enfermos. Desde niña, Santa María Eufrasia fue testigo de que la fe se expresa en la acción. En años posteriores, aconsejaría a sus novicias acerca de las personas a su cargo: "No basta con que las ames, ellas deben saber que las amas".

Siendo adolescente, Santa María Eufrasia asistió a un internado en Tours, Francia, y se familiarizó con las Hermanas de Nuestra Señora de la Caridad del Refugio que residían cerca. Esta Orden había sido fundada por San Juan Eudes en 1641. Se sintió especialmente atraída por la misión de estas hermanas, que atendían a niñas y mujeres en situaciones difíciles. Algunas de ellas habían sido abandonadas por sus familias o eran huérfanas; otras se veían obligadas a prostituirse para sobrevivir. Las hermanas les daban cobijo, comida, formación profesional y la oportunidad de dar un giro a sus vidas. Santa María Eufrasia ingresó en la Congregación de Nuestra Señora de la Caridad del Refugio de Tours a los 18 años y recibió el nombre religioso de María Eufrasia.